Liquid AST (SGOT)Reagent SetКаталожный № HTI-A7561Каталожные номера:HTI-A7561-120HTI-A7561-600НазначениеНабор предназначен для количественногоопределения аспартатаминотрансферазы (АСТ) всыворотке крови.Клиническое значениеАктивность фермента аспартатаминотрансферазы(АСТ) определяется во многих тканях. Наиболеевысокая активность АСТ обнаружена в ткани печени,сердца, скелетной мускулатуры и почек. Приповреждении ткани этих органов происходитповышение в сыворотке крови уровня АСТ. Послеинфаркта миокарда уровень АСТ повышается идостигает пика через 48-60 часов.При заболеваниях печени и желчного пузыря, такихкак цирроз, метастатическая карцинома, вирусныйгепатит происходит повышение уровня АСТ.Повышение уровня АСТ происходит и при такихсостояниях как мышечная дистрофия,дерматомиозиты, острый панкреатит, инфекционныймононуклеоз.История методаKarmen и соавт. в 1955 году разработаликинетический метод определения активности АСТ сиспользованием малатдегидрогеназы и NADH. Henryи соавт. в 1960 году, Amador и Wacker в 1962 годумодернизировали этот метод. В 1974 году комитет поферментам Скандинавского Общества КлиническойХимии и Клинической Физиологии (ScandinavianSociety for Clinical Chemistry and Clinical Physiology)рекомендовали этот метод в оптимальноймодификации. В 1976 году МеждународнаяФедерация Клинической Химии (IFCC)рекомендовала использование пиридоксаль-5-фосфата в реакционной смеси, что позволилоувеличить активность фермента.Принцип тестаL-аспартат + α-кетоглутарат АСТ Оксалоацетат + L-глутаматОксалоацетат + NADH + H+ МД L-малат + NAD+ + H2OАСТ катализирует перенос аминогрупп с L-аспартата наα-кетоглутарат с образованием оксалоацетата и L-глутамата. Оксалоацетат подвергается окислению, приэтом NADH окисляется до NAD. Катализатором реакцииявляется малатдегидрогеназа. Снижение абсорбции при340 нм прямо пропорционально активности АСТ висследуемом образце. Лактатдегидрогеназа используетсядля предупреждения влияния эндогенного пирувата,который присутствует в сыворотке крови здоровогочеловека.РеагентыПосле смешивания реагента А и реагента В концентрацияL-аспарагиновой кислоты 200 мМ, α-кетоглутаровойкислоты 12 мМ, Лактатдегидрогеназы (микробная) > 1000МЕ/мл, Малатдегидрогеназы (микробная) 800 МЕ/л,NADH 0,18 мМ, Буфер рН 7,8+0,1, азид натрия 0,01.Стабилизаторы.Подготовка реагентовСмешать 5 объемов реагента R1 и 1 объем реагента R2(например, 250 мл реагента R1 и 50 мл реагента R2).Хранение реагентов и стабильность1. Хранить в холодильнике при 2-80С.2. Неоткрытый набор можно использовать доистечения срока годности, который указан наэтикетке набора. Растворенные реагенты стабильныв течение 2 дней при комнатной температуре (18-250С) и 14 дней в холодильнике при 2-80С.Непригодные для анализа реагентыНе использовать реагент если:1. Начальная абсорбция рабочего реагента противводы при 340 нм больше 0,800.2. Изменились свойства реагента.Предостережения1. Только для in vitro диагностики2. Реагент R1 содержит в качестве консерванта растворазида натрия