Иммунный статус эндометрия женщин с трубной формой бесплодия в программах вспомогательных репродуктивных технологий.
В.А. Хоржевский, С.А. Игошина, А.К. Кириченко, М.И. Базина, В.Д. Соколов, А.А.Барановский, И.В. Вершинин
Красноярская государственная медицинская академия, кафедра па¬тологической анатомии им. П. Г. Подзолкова.
НУЗ «Дорожная клиническая больница на станции Красноярск ОАО “РЖД“, патологоанатомическое отделение. ООО “Медицинский центр гинекологической эндокринологии и репродукции”, г. Красноярск.
КГУЗ “Красноярское краевое патологоанатомическое бюро”. Отделение патологической анатомии ГБ №4 г. Красноярск.
Материалы международной научно-практической конференции «Иммунологические аспекты репродукции человека» Новосибирск 5 – 5 марта 2008 года. Страницы 86 — 87
Актуальность.
На долю трубного и перитонеального бесплодия у женщин приходится до 40%, основной причиной которого являются перенесенные ранее воспалительные заболевания матки и ее придатков. При рецидивирующем воспалении придатков частота развития бесплодия достигает 54% с частым формированием сактосальпинкса.
Изменения, возникающие в стенке трубы при гидросальпинксе, хорошо изучены, и наблюдаются в строме, стенках сосудов, эпителиальной выстилке. Однако работы посвященные изучению изменений, возникающих в слизистой оболочке матки, длительном воздействии содержимого гидросальпинкса встречаются крайне редко и носят разрозненный характер. Особый интерес к этой проблеме обусловлен тем фактом, что гидросальпинкс является одной из самых частых причин не только бесплодия, но и повторяющихся неудач при попытках проведения вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) и переноса эмбриона
Цель исследования.
Оценить изменения, возникающие со стороны иммуноцитов стромы эндометрия, под влиянием гидросальпинкса у женщин с трубной формой бесплодия в программах ВРТ.
Материалы и методы исследования.
Основную группу составили 30 женщин с первичным трубным бесплодием при одностороннем или двустороннем гидросальпинксе. В группу сравнения вошли 30 женщин с установленной фертильностью и регулярным менструальным циклом с неотягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом. Средний возраст обследуемых женщин составил 35,2 ± 2,1 и 34,1 ± 1,2 лет соответственно. Длительность бесплодия к моменту исследования у женщин исследуемой группы составила 32,2 ± 6,3 месяцев. Диагноз гидросальпинкса в каждом из случаев устанавливался в ходе ультразвукового исследования органов малого таза, и впоследствии подтверждался при морфологическом исследовании удаленных труб лапароскопически труб. В план исследования всех женщин было включено исследование гормонов периферической крови: ЛГ, ФСГ, пролактина, эстрадиола, прогестерона. При определении инфекционного статуса методами ИФА и ПЦР у 75% женщин основной группы диагностирована хламидийная инфекция, у 20% – мико-уреаплазменная инфекция, и в 5% наблюдений выявлен генитальный герпес. Все женщинам было проведено специфическое лечение с учетом выявленного этиологического фактора. В группе сравнения сексуально-трансмиссионных заболеваний выявлено не было.
Ткань эндометрия, получали при выскабливании полости матки во время гистероскопии или при пайпель-аспирации в среднюю стадию фазы пролиферации. Женщинам группы сравнения пайпель-аспират проводился в рамках прегравидарного обследования. Парафиновые срезы стандартной толщины (5,0 мкм) окрашивались гематоксилином и эозином и по Ван-Гизону. Иммуногистохимическое окрашивание проводилось согласно стандартному протоколу для окрашивания парафиновых срезов стрептавидин-биотиновым методом. Подсчет числа клеток с позитивным иммуногистохимическим окрашиванием проводился при увеличении х 400. Для каждого случая обрабатывались до 30 полей зрения. Площадь поля зрения при увеличении х400 составила 11685,37 мкм2. Оценка морфометрических показателей проводилась с применением программного обеспечения Image Tool UTHSCSA v. 3.0 для среды Windows XP. Полученные данные обрабатывались методом вариационной статистики с помощью программы Statistica 6.0 StatSoft. Достоверность различий определялась по t-критерию Стьюдента. Уровень различий при p < 0,05 рассматривался как статистически значимый. Результаты. При рутинном микроскопическом исследовании в слизистой оболочке матки женщин исследуемой группы с большим постоянством выявлялись единичные участки фиброза. Железистый компонент эндометрия был представлен трубчатыми железами с узкими просветами и несколько уплощенным эпителий, что напоминало эндометрий покоящегося типа. В строме слизистой оболочки, определялись небольшие, большей частью перигландулярно расположенные, лимфоидные инфильтраты. Также среди фибробластов стромы эндометрия обнаруживались диффузно распределенные лимфоциты. В отдельных полях зрения обращала на себя внимание пролиферация мелких капиллярного типа сосудов, что часто сочеталось со склерозом стромы Вышеописанная картина в целом отражала изменения, характерные для хронического неспецифического воспалительного процесса в слизистой матки. В ходе проведенного иммуногистохимического исследования в эндометрии группы женщин с гидросальпинксом обнаруживались скопления иммунных клеток, относящихся к Т-клеточному звену иммунитета, экспрессирующих на цитолемме CD8 и CD45RO антигены. В эндометрии женщин с гидросальпинксом CD45RO-позитивные Т-лимфоциты обнаруживались в непосредственной близости от базальной мембраны желез, межэпителиальном пространстве, в просвете желез, а в отдельных случаях на поверхности покровного эпителия среди слизи. Исследование клеток макрофагально-гистиоцитарного звена в эндометрии группы женщин с гидросальпинксом показало статистически значимое увеличение количества CD68-позитивных клеток в сравнении с группой контроля, имевших морфологию макрофагов. Проведенные клинико-морфологические сопоставления выявили следующие закономерности. Частота наступления беременности на один перенос эмбриона в исследуемой группе женщин при гидросальпинксе составил 16,5% (5), при этом частота развития осложнений течения беременности достигала 100%. Из них в двух наблюдениях отмечено возникновение анэмбрионии, у двух женщины неразвивающаяся беременность, связанная с отслойкой хориона и низкой нидацией плодного яйца. Сохранившиеся 3 беременности завершилась преждевременными родами с неблагоприятным перинатальным исходом (оценка по шкале Апгар при рождении 3-4 балла, ИВЛ). Выводы. Таким образом, под влиянием содержимого гидросальпинкса, в эндометрии наибольшие изменения наблюдаются в структуре Т-клеточного звена иммунной системы, и Т-клеток памяти (CD45RO) в частности. При этом Т-клетки памяти не только распределены диффузно в строме эндометрия, но и формируют лимфоидные агрегаты вблизи желез, выходят в межэпителиальное пространство. Выполненные нами исследования эндометрия женщин с гидросальпинксом, подтверждают, что содержимое гидросальпинкса, приводит к выраженным нарушениям локальных иммунных реакций в эндометрии, что может неблагоприятно влиять на эффективность лечения бесплодия ВРТ и определяет осложненное течение беременности.