Определение концентрации ДНК Neisseria gonorrhoeae с помощью количественной ПЦР «в рельном времени» в клинических образцах пациентов, обследованных на гонококковую инфекцию
Автор: Гущин А.Е., Цеслюк М.А., Савочкина Ю.А. Шипулин Г.А. Организация: ФГУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора

Введение.
В Российской Федерации регламентированными методами диагностики гонококковой инфекции являются микроскопия (МС) окрашенного по Граму препарата   и бактериологический посев (БП), однако многочисленные зарубежные исследования показали, что диагностическая чувствительность (ДЧ) указанных методов уступает современным молекулярно-биологическим тестам,  основанным на методах амплификации нуклеиновых кислот (МАНК).    Высокую ДЧ МАНК связывают с более высокой аналитической чувствительностью, позволяющей обнаруживать генетический материал единичных клеток возбудителя. Появление метода ПЦР с детекцией флуоресцентного сигнала в реальном времени (ПЦР «в реальном времени») позволяет определить концентрацию ДНК возбудителя в клиническом образце, которая отражает бактериальную нагрузку в очаге воспаления.
Целью настоящего исследования явилось определение концентрации ДНК N.gonorrhoeae в клинических образцах пациентов, обследованных на гонококковую инфекцию регламентированными методами – МС и БП, а также    методом ПЦР в качественном формате.
Материалы и методы:
Было обследовано 156 мужчин и 213 женщин обратившихся в КВД. Получение клинических образцов,  процедуры МС и БП, а также  исследования методом ПЦР в качественном формате описаны в работах [Сехин С.В. дисс. канд. мед. наук, Вознесенский Д.Л., дисс. канд. мед. наук].  Клинические образцы исследованные методом ПЦР в качественном формате были повторно исследованы методом ПЦР  «в реальном времени» в количественном формате. Разработка методики для определения концентрации ДНК N.gonorrhoeae в клиническом материале с помощью ПЦР «в реальном времени» нами была подробно описана в сборнике трудов 5-й Всероссийской научно-практической конференции «Генодиагностика инфекционных болезней» 2004.
Результаты:
Результаты полученные как зарубежными, так  и отечественными исследователями свидетельствуют том, что ДЧ регламентированных методов ниже, чем МАНК и  прежде всего при диагностике гонококковой инфекции у женщин (Таблица 1).
 
Таблица 1.

Метод исследования

ДЧ %
Сехин С.В.,
Вознесенский Д.Л.

ДЧ %
Ching S., 1995;
Mandell G., 2005

Муж.
N=156

Жен.
N=213

Муж.
N=808

Жен.
N=1539

Микроскопия

92.6

36.6

95