ПРИЧИНЫ БЕСПЛОДИЯ ПРИ ЭНДОМЕТРИОЗЕНарушение продукции плацентарных белков (ТБГ, ПАМГ-2) как фактор бесплодия у женщин с наружным генитальным эндометриозомЛ.В. Посисеева, А.О. Назарова Кафедра акушерства и гинекологии Ивановской государственной медицинской академии; Ивановский НИИ материнства и детства им. В.Н. Городкова Минздрава Российской Федерации Проблемы репродукции, 3-1999, с.48-51Впервые исследовано содержание специфических белков репродуктивной системы человека — ТБГ и ПАМГ-2 в перитонеальной жидкости у женщин. Показана связь между уровнем специфических плацентарных белков и нормальной и нарушенной репродуктивной функцией у женщин. Обсуждается роль изученных протеинов в механизме бесплодия при наружном генитальном эндометриозе в виде влияния на фагоцитоз сперматозоидов перитонеальными макрофагами. Ключевые слова: плацентарные белки, макрофаги, фагоцитоз.После открытия в 1970 г. Ю.С. Татариновым и В.Н. Масюкевичем [1] трофобластспецифического -гликопротеина (ТБГ) начался новый этап визучении белков репродуктивной системы человека. Основное практическое значение имеют ТБГ [2-5] и плацентарный 2-микроглобулин (ПАМГ-2) [6-9]. Синтез ТБГ у небеременных женщин осуществляется в железах эндометрия и эпителии маточных труб [5]. Получены убедительные данные об иммуносупрессивной активности ТБГ [10, 11]. В дальнейших исследованиях дано теоретическое обоснование возможности применения ТБГ в качестве иммуномодулирующего фактора при терапии патологии беременности. Вопрос о содержании ТБГ в крови и других биологических жидкостях при бесплодии не получил достаточного освещения в литературе. Имеются лишь единичные сообщения о повышении уровня ТБГ в периферической крови у бесплодных женщин с <запущенным> эндометриозом [5].Синтез ПАМГ-2 у небеременных женщин осуществляется железистыми эпителиальными клетками эндометрия и мерцательным эпителием маточных труб [12-14]. Содержание ПАМГ-2 исследовано в разных биологических средах: у женщин — в периферической и менструальной крови, у мужчин — в периферической крови и сперме. Выявлена связь между уровнем ПАМГ-2 и характером менструальной функции у женщин, а также нормальной и нарушенной генеративной функцией в супружеской паре. Имеются отдельные данные литературы о повышении содержания ПАМГ-2 в сыворотке крови в периовуляторный период при распространенных формах эндометриоза [15].Таким образом, имеющиеся данные литературы носят фрагментарный характер и не позволяют сделать вывод об общих закономерностях изменения концентрации белков репродуктивной системы и их роли в патогенезе бесплодия. В связи с этим нами изучено содержание ТБГ и ПАМГ-2 в перитонеальной жидкости и их значение в репродуктивной функции женщин в норме и при наружном генитальном эндометриозе.МетодыОбследованы 32 молодые женщины с нормальной репродуктивной функцией (23 — с отсутствием патологии внутренних половых органов и 9 — с наличием наружного генитального эндометриоза) и 73 пациентки с нарушенной репродуктивной функцией и наружным генитальным эндометриозом. Пробы перитонеальной жидкости у женщин получены при проведении лапароскопии, образцы спермы — от здоровых мужчин при обследовании в Перинатальном центре Ивановского НИИ материнства и детства Минздрава России. В контрольной группе женщин лапароскопия производилась с целью стерилизации по социальным показаниям. В остальных случаях операция была выполнена с диагностической и лечебной целями. В перитонеальной жидкости определяли содержание ТБГ, ПАМГ-2 методом иммуноферментного анализа с использованием наборов фирмы <Диагност> (Москва).Фагоцитарная активность макрофагов перитонеальной жидкости исследована у 18 женщин (у 6 — здоровых, у 2 — с наружным генитальным эндометриозом). Для оценки функционального состояния перитонеальных макрофагов осуществляли их кратковременное культивирование в присутствии сперматозоидов в соответствии с методикой [11]. Процедура исследования включала следующие этапы: 1) взятие перитонеальной жидкости; 2) адгезия макрофагов к стеклу; 3) культивирование макрофагов в присутствии суспензии сперматозоидов; 4) промывание средой 199 для удаления нефагоцитированных и неадгезированных сперматозоидов и эритроцитов; 5) фиксация в 1% растворе глутарового альдегида (, Швейцария) в среде 199 (рН 7,4) в течение 24 ч; 6) окраска препаратов по Романовскому, заключение в среду (, Великобритания) и дифференцированный подсчет клеток. При исследовании препаратов осуществляли дифференцированный подсчет макрофагов с выделением следующих функциональных классов клеток: 1) нефагоцитирующие макрофаги; 2) макрофаги, фагоцитирующие 1 сперматозоид; 3) макрофаги, фагоцитирующие 2 сперматозоида и более; 4) макрофаги, фагоцитирующие эритроциты.Исследовано влияние концентрации ТБГ в культуральной среде в концентрациях 0,6, 1,5 и 3,0 мкг/мл; антисыворотки к ТБГ в количестве 0,02, 0,05 и 0,1 мл соответственно; ПАМГ-2 — в концентрации 25 и 75 мкг/мл на процесс фагоцитоза сперматозоидов. Препараты белков с чистотой около 75 % получены на кафедре биохимии (зав. — проф. Ю.С. Татаринов) Российского государственного медицинского университета.Статистическую обработку полученных данных проводили методами вариационного анализа с использованием t-критерия Стьюдента.РезультатыИзучение содержания ТБГ в перитонеальной жидкости показало отсутствие статистически достоверных различий показателей этого белка в динамике менструального цикла в обследованных группах женщин. В группе здоровых женщин (контроль) содержание ТБГ составило в I фазе менструального цикла 8,29 4,24 нг/мл, во II фазе — 2,17 1,30 нг/мл (в среднем 6,45 3,06 нг/мл). В группе фертильных женщин с наличием наружного генитального эндометриоза среднее содержание ТБГ не отличалось от такового в контрольной группе и составило 7 2,62 нг/мл. В группе женщин с бесплодием, обусловленным наружным генитальным эндометриозом, уровень ТБГ был увеличен как в I фазе (до 18,8 4,01 нг/мл), так и во II фазе менструального цикла (до 15,09 3,53 нг/мл). У этих женщин средние показатели ТБГ во II фазе цикла были в 7 раз выше по сравнению с таковыми в контрольной группе (р<0,01). Средняя концентрация ТБГ составила 16,96 2,68 нг/мл и была достоверно выше по сравнению с таковой у женщин с нормальной репродуктивной функцией (р<0,05).Концентрация ТБГ в перитонеальной жидкости у женщин с бесплодием, обусловленным наружным генитальным эндометриозом, прогрессивно возрастает по мере увеличения распространенности патологического процесса. Так, средняя концентрация ТБГ у женщин с I степенью эндометриоза составляла 8,60 4,98 нг/мл. Уровень белка у женщин со II степенью эндометриоза в 1,9 раза выше по сравнению с I степенью. Средние значения ТБГ у пациенток с III-IV степенью эндометриоза заболевания по сравнению с больными I и II степенью больше в 2,5 и 1,4 раза соответственно. Концентрация этого протеина у женщин со II и III-IV степенью заболевания достоверно выше, чем в контрольной группе (р<0,05).При ретроспективном анализе с учетом результатов лечения обнаружено, что восстановление репродуктивной функции у женщин с эндометриозом происходило при более высоких показателях ТБГ в перитонеальной жидкости (21,20 5,48 нг/мл) в сравнении с контрольной группой (р<0,05).Содержание ПАМГ-2 в перитонеальной жидкости статистически достоверно различалось в динамике менструального цикла у обследованных женщин. В контрольной группе оно составило в I фазе менструального цикла 33,8 12,6 нг/мл, во II фазе — 43,5 25,4 нг/мл (в среднем 36,72 11,66 нг/мл). В группе фертильных женщин с наличием наружного генитального эндометриоза средняя концентрация ПАМГ-2 (31,11 10,55 нг/мл) не отличалась от таковой в контрольной группе. В группе женщин с бесплодием, обусловленным наружным генитальным эндометриозом, содержание ПАМГ-2 составляло в I фазе менструального цикла 41,0 6,05 нг/мл, во II фазе — 28,9 3,92 нг/мл (в среднем 35,04 3,70 нг/мл).Концентрация ПАМГ-2 в перитонеальной жидкости у женщин с бесплодием, обусловленным наружным генитальным эндометриозом, достоверно не изменяется по мере увеличения распространенности патологического процесса. Однако выявлено достоверное снижение частоты встречаемости индивидуальных показателей ПАМГ-2 (< 30 нг/мл) у женщин с наружным генитальным эндометриозом III-IV степени (в 35,3% случаев) по сравнению с контрольной группой (р<0,05).При проведении ретроспективного анализа результатов лечения у пациенток этой группы не выявлено достоверных различий в средних значениях ПАМГ-2 в перитонеальной жидкости.Учитывая наши данные о значительном повышении содержания ТБГ в перитонеальной жидкости у женщин с эндометриозом и данные об иммуномодулирующем действии ТБГ и ПАМГ-2, мы изучили влияние этих белков на процесс фагоцитоза сперматозоидов перитонеальными макрофагами.